Detekcja białek w żelu poliakrylamidowym
Barwienie coomasie blue
Barwienie coomasim jest nieodwracalne. Stosujemy je w celu uwidocznienia wszystkich białek po rozdziale elektroforetycznym, gdy nie planujemy dalszego elektrotransferu, lub już po przeprowadzonym elektortranswerze w celu sprawdzenia jego efektywności.
- Umieść żel w roztworze A. Inkubuj go z delikatnym mieszaniem od 4 godzin do nocy w temperaturze pokojowej
- Przenieś żel do roztworu B i inkubuj go z mieszaniem. W zależności od potrzeb zmień bufor. Inkubację prowadź tak długo aż żel nie zawierający białek się odbarwi i pozostaną niebiesko wybarwione miejsca, w których znajdują się białka.
- Bufor A
- 10% kwas octowy
- 50% metanol
- 0.25% roztwór Coomassie Brilliant Blue R-250
- woda destylowana
- Bufor B
- 7,5% kwas octowy
- 25% metanol
- woda destylowana
Autor: dr Joanna Skubis-Zegadło
