Izolacja białek metodą dezintegracji błon komórkowych ultradźwiękami
- Zwirować hodowlę E.coli
- Osad uzyskany po wirowaniu hodowli E.coli zawiesić w buforze do zawieszania białek zawierającym lizozym (1mg/ml)
- Próbkę sonikować przy amplitudzie drgań 42µm i mocy 0,85kW, w 6 cyklach po 10s z 15s przerwami, utrzymując próbkę w lodzie i nie dopuszczając do jej przegrzania
- Następnie całość zwirować
- Otrzymane lizaty komórkowe można poddać analizie elektroforetycznej w żelu poliakrylamidowym denaturującym
- Bufor do zawieszania białek
- 50mM NaH2PO4, pH 8,0
- 300mM NaCl
- 20mM imidazol
- 10% (v/v) glicerol
- 0,1% Triton X-100
Autor: dr Agnieszka Sałamaszyńska-Guz
