Monoazydek etydyny (EMA) + real-time PCR = amplifikacja tylko żywych komórk z mieszanej populacji

Odróżnienie żywych od martwych komórek jest ważnym etapem wielu metod molekularnych. Sporą trudność nastręcza jakościowe zróżnicowanie żywych i martwych komórek w mieszanej populacji.

Autorzy zaproponowali metodę amplifikacji DNA tylko żywych komórek w mieszaninie żywych i martwych komórek z wykorzystaniem monoazydku etydyny (EMA). Monoazydek etydyny– łączy się z DNA martwych komórek. Związek ten nie penetruje prawidłowych błon komórkowych i dlatego nie wnika do żywych komórek. EMA po związaniu DNA ulega fotolizie światłem widzialnym z utworzeniem kowalencyjnego wiązania. DNA martwych komórek które jest kowalencyjnie połączone z EMA nie amplifikuje się podczas reakcji PCR. Stąd tylko DNA żywych komórek jest wykrywane podczas reakcji real-time PCR.

Na podstawie: "Use of Ethidium Monoazide and PCR in Combination for Quantification of Viable and Dead Cells in Complex Samples" Knut Rudi,Birgitte Moen, Signe Marie Drmtorp, and Askild L. Holck, AEM.71.2.1018–1024.2005.