Precypitacja RNA -wytrącanie RNA.

Zatężanie próbek RNA. Metoda pozwala na uzyskanie większej ilości RNA poprzez strącenie próbki RNA i zawieszenie jej w mniejszej ilości wody. Dodanie glikogenu do precypitowanych próbek nie jest wymagane, jednakże może poprawić widoczność peletu i zwiększyć odzyskiwanie RNA nie wpływając jednocześnie na jakość kolejnych eksperymentów.

1. Dodać 1/10 objętości 3M octanu sodowego o pH 5,2 do próbki RNA (w przypadku 50ul próbek dodać 5ul)
2. Dodać 1 ul glikogenu (5mg/ml) do próbki
3. Dodaj 2,5 objętości etanolu do próbek i inkubuj przez godzinę w -20°C (w przypadku 50ul próbek dodać 125ul)
4. Zwiruj 30 min, 12 000 xg, 4°C
5. Przepłucz dwukrotnie pelet 80% etanolem
6. Wysusz pelet i zawieś w mniejszej niż wyjściowo objętości wody (RNase-free)

Autor: dr Joanna Skubis-Zegadło