Metody

Kategoria: Metody

Tagi: białka biochemia biotechnologia chemiluminescencja

Data: 2009-09-16

Zdejmowanie przeciwciał (stripowanie) z membrany PVDF z wykorzystaniem NaOH.

Prosta metoda zdejmowania przeciwciał z membrany PVDF, uprzednio wykorzystywanej do detekcji odczynnikami chemiluminescencyjnymi. Podczas zdejmowania przeciwciał tą metodą istnieją jednak pewne straty białka, dlatego jedną membranę można stripować w ten sposób około 5 razy.

  1. Wypłucz membranę wodą destylowaną
  2. Inkubuj membranę 5 minut z 0,2M NaOH
  3. Wypłucz membranę wodą destylowaną
  4. Wysyć membranę (5%BSA lub 5% odtłuszczonym mlekiem)
  5. Inkubuj z nowym przeciwciałem pierwszorzędowym i drugorzędowym

Autor: dr Joanna Skubis-Zegadło

Na podstawie: RWL Suck & K Krupinska 1996 BioTechniques 21 418-422

Zapraszamy do dyskusji na ten temat na naszym forum http://metlab.pl/forum/topic102-zdejmowanie-przeciwcial-stripowanie-z-membrany-pvdf-z-wykorzystaniem-naoh.html