1 Temat przez monia

  • monia
  • New member
  • Nieaktywny
  • Zarejestrowany: 2007-06-06
  • Posty: 2

Temat: Western-blot----tło

Witam wszystkich
mam problem z tłem w metodzie Western-blot. czy macie jakieś sprawdzone sposoby na zmiejszenie go?

2 Odpowiedź przez magda

  • magda
  • New member
  • Nieaktywny
  • Zarejestrowany: 2007-06-11
  • Posty: 1

Odp: Western-blot----tło

halo, nie wszedzie /w kazdym dziale/ moge napisac posta (np. nie moge w dziale: Uwagi o serwisie), a chcialam napisac uwage: swietna robota Rude Sloneczko!!!

3 Odpowiedź przez hanias

  • hanias
  • New member
  • Nieaktywny
  • Zarejestrowany: 2007-07-22
  • Posty: 3

Odp: Western-blot----tło

Hej

Jest wiele sposobów na zmniejszenie tła w metodzie western-blot. Niestety nie piszesz szczegółów....... więc nie wiem co może być prawdopodobną przyczyna tła. Musisz wypróbować kilka wariantów może któryś bedzie skuteczny:

-zmniejsz ilość I/II przeciwciała
-zmień bufor wysycający (jeśli do tej pory stosowałaś mleko zmień na BSA, alkohol poliwinylowy lub jakiś komercyjnie dostępny produkt).
-zwiększ ilość płukań po I i po II przeciwciele (możesz również po każdym płukaniu lekko "przesuszyć" membranę- pozostawiając ją na ok 30 sek bez buforu płuczącego).
-sprawdz niespecyficzne wiązanie II przeciwciała do membrany->może należy zmienić II przeciwciało.

4 Odpowiedź przez stars

  • stars
  • New member
  • Nieaktywny
  • Zarejestrowany: 2007-07-24
  • Posty: 3

Odp: Western-blot----tło

hej

możesz jeszcze spróbować dodać troszkę więcej tweenu do buforu płuczącego.....