• Zarejestrowany: 2007-07-19
  • Posty: 2

Temat: Jak zrobić żel do elektroforezy?

Jestem początkującym genetykiem i mam pytanie dotyczące żelu. Zrobiłam bufor TBE 10x rozcięczony  do elektroforezy. Czy taki bufor nadaje sie do zrobienia żelu, czy muszę go rozcięczyć , tak aby był rozcięczony 1x.
Mam taki przepis na żel; 1gram agarozy+100 ml buforu TBE 10x rozcięczonego + 2,5 mikrolitra bromku
A może przepis powinien wyglądać tak; 1gram +100 ml buforu 1x rozcięczonego + 2,5 mikrolitra bromku
Pomuszcie, wyizolowałam plazmidowe DNA z E.coli, i muszę sprawdzić czy wyszło.

2 Odpowiedź przez marzenaww

  • Zarejestrowany: 2007-07-19
  • Posty: 2

Odp: Jak zrobić żel do elektroforezy?

marzenaww napisał/a:

Jestem początkującym genetykiem i mam pytanie dotyczące żelu. Zrobiłam bufor TBE 10x rozcięczony  do elektroforezy. Czy taki bufor nadaje sie do zrobienia żelu, czy muszę go rozcięczyć , tak aby był rozcięczony 1x.
Mam taki przepis na żel; 1gram agarozy+100 ml buforu TBE 10x rozcięczonego + 2,5 mikrolitra bromku
A może przepis powinien wyglądać tak; 1gram +100 ml buforu 1x rozcięczonego + 2,5 mikrolitra bromku
Pomuszcie, wyizolowałam plazmidowe DNA z E.coli, i muszę sprawdzić czy wyszło.

3 Odpowiedź przez marian

  • marian
  • New member
  • Nieaktywny
  • Zarejestrowany: 2007-07-04
  • Posty: 2

Odp: Jak zrobić żel do elektroforezy?

witam
przepis na żel powinien wyglądć tak:

1gram +100 ml buforu 1x TBE+ 2,5 mikrolitra bromku.

PIszesz: "Zrobiłam bufor TBE 10x rozcięczony  do elektroforezy" tzn rozcieńczyłaś 10 razy przygotowany bufor TBE 10 x stężony? Jeśli tak to OK.

Jeśli coś jest oznaczone 10x to oznacza że jest to bufor 10x stężony i trzeba go 10x rozcieńczyć (9 części wody i jedna część buforu)

4 Odpowiedź przez MonikaB

  • Zarejestrowany: 2007-06-18
  • Posty: 2

Odp: Jak zrobić żel do elektroforezy?

Witam.
wedlug mnie prawidlowy przepis to TBE 1X. Nie dodawalabym tez bromku etydyny do zelu, gdyz to zbyt brudna sprawa. Mozesz zrobic ze bez bromku, potem go wyplukac w wodzie z bromkiem i odplukac w czystej wodzie. W ten Twoje DNA bedzie mialo bromek a nie caly zle. Szczegolnie jezeli jestes poczatkujaca a zel z bromkiem odrazu to troche niebezpieczna sprawa. ja robilam tak zele 5 lat i zawsze wychodzilo.
Nie pamietam stezenia bromku, ktore nalzey dodac do wody, ale mysle, ze to z latwoscia znajdziesz w necie.
Pozdrawiam

5 Odpowiedź przez MonikaB

  • Zarejestrowany: 2007-06-18
  • Posty: 2

Odp: Jak zrobić żel do elektroforezy?

Witam.
wedlug mnie prawidlowy przepis to TBE 1X. Nie dodawalabym tez bromku etydyny do zelu, gdyz to zbyt brudna sprawa. Mozesz zrobic zel bez bromku, potem go wyplukac w wodzie z bromkiem i odplukac w czystej wodzie. W ten Twoje DNA bedzie mialo bromek a nie caly zel. Szczegolnie jezeli jestes poczatkujaca a zel z bromkiem odrazu to troche niebezpieczna sprawa. ja robilam tak zele 5 lat i zawsze wychodzilo.
Nie pamietam stezenia bromku, ktore nalzey dodac do wody, ale mysle, ze to z latwoscia znajdziesz w necie.
Pozdrawiam