1 Temat przez edith

  • edith
  • New member
  • Nieaktywny
  • Zarejestrowany: 2010-10-28
  • Posty: 1

Temat: barwienie jąder YO-PRO1 a proLong Antifade Reagent

Witam wszystkich!
Mam problem przy sporządzaniu preparatu do mikroskopu fluorescencyjnego i konfokalnego. Barwię jądra komórkowe jodkiem YO-PRO1. Jednakże nałożenie na preparat odczynnika ProLong Gold Antifade Reagent, który ma zapobiegać szybkiemu "wyświeceniu" preparatu, powoduje że barwnik nie zostaje w jądrze i zazwyszaj świeci całą komórka (cytoplazama). Natomiast gdy zamiast tego odczynnika stosuje PBS wszystko jest ok i otrzymuje ślicznie wybarwione jądra. Dodam tylko że nałożenie ProLong Gold Antifade Reagent jest niezbędne, aby wykonać zdjęcie w mikroskopie konfokalnym. Może ma ktoś jakieś doświadczenie z Antifate i podzieli się ze mną swoimi spostrzeżeniami.
Z góry dzięki za pomoc;)
Edyta

2 Odpowiedź przez stella

  • stella
  • New member
  • Nieaktywny
  • Zarejestrowany: 2007-11-16
  • Posty: 2

Odp: barwienie jąder YO-PRO1 a proLong Antifade Reagent

Witam serdecznie

Nie mam bezpośredniego doświadczenia z odczynnikiem "ProLong Gold Antifade Reagent", ale wygląda na to, że preparat ten w niespecyficzny sposób reaguje z cytoplazmą komórki.

Proponuje:
--Zmniejszyć ilość tego odczynnika
--Zwiększyć ilość płukań po jego zastosowaniu (jeśli są wymagane w przepisie)
--Wykonaj próbę z samym odczynnikiem aby upewnić się, że nie emituje on jakiegoś świecenia (czy to jest w ogóle możliwe????? smile).

Daj znać jak udało Ci się rozwiązać ten problem.......

pozdrawiam
/S.

Ostatnio edytowany przez stella (2010-11-01 21:02:07)